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代謝組學測序樣本及樣本量要求

在生命科學研究的廣闊領域中,代謝組學作為一門新興且充滿活力的學科,正逐漸嶄露頭角。它通過對生物體內代謝物的全面分析,揭示了生物體在不同生理狀態、疾病進程以及環境因素作用下的代謝變化。然而,要想準確捕捉這些代謝變化,代謝組學測序的樣本及樣本量要求就顯得尤為重要。

代谢组学测序样本及样本量要求

代謝組學測序樣本

一、樣本類型代謝組學研究的樣本類型多種多樣,常見的包括:1、動物或臨床樣本:如血清、血漿、尿液、唾液、腦脊液、關節液、淋巴液、組織(如肝、腎、肌肉、腫瘤等)、細胞及其培養基等。 2、植物樣本:如葉片、莖、花、根、果實等。 3、微生物樣本:如細菌、真菌及其發酵液等。

二、樣本收集與保存不同類型的樣本在收集與保存時需注意以下要點:1、血液樣本(血清、血漿):從合適的靜脈採集血液,通常採集量為10mL左右。使用肝素鋰抗凝管(用於血漿)或普通血清管進行收集。離心分離出血清或血漿,並分等份(如0.5mL或0.1mL)轉移到凍存管中。保存於-80℃冰箱,寄送時需使用足量乾冰。 2、尿液樣本:收集晨起中段尿(臨床)或晨間1小時尿(動物)。直接分裝到離心管中,每管1mL左右。添加疊氮化鈉作為防腐劑,並儘快進行離心處理。保存於-80℃冰箱,寄送時需使用足量乾冰。 3、組織樣本:從動物或人體上取下組織後,先用生理鹽水沖洗乾淨。用乾淨的無塵吸水紙吸乾水分,然後分等份(如20mg/管)裝入標記好的離心管中。迅速放入液氮中冷凍處理至少15分鐘,然後保存於-80℃冰箱。 4、細胞樣本:對於懸浮細胞,連同培養基轉移到離心管中,低速離心使細胞沉澱。倒掉培養基後,用PBS清洗一次,再次離心後倒掉PBS。將離心管的尖端插入液氮中淬滅細胞,然後保存於-80℃冰箱。對於貼壁細胞,先倒掉培養基,用PBS清洗一次後,將培養皿底部接觸液氮淬滅細胞。加入甲醇-水溶液將細胞刮下並轉移到離心管中,然後保存於-80℃冰箱。 5、植物樣本:取整片葉片、一段莖、一朵花或根等部分,迅速用PBS漂洗去掉泥土雜質等。放入離心管或錫箔紙中並標記,迅速放入液氮中冷凍處理至少15分鐘。取出後迅速放入自封袋中,並註明樣本信息。保存於-80℃冰箱,寄送時需使用足量乾冰。 6、微生物樣本:將微生物連同培養基轉移到離心管中,低速離心使細菌沉澱。倒掉培養基後,用PBS清洗一次並離心收集菌體。將離心管的尖端插入液氮中淬滅細菌,然後保存於-80℃冰箱。

三、樣本量要求代謝組學測序的樣本量要求通常根據實驗設計和样本類型而定。一般來說:1、血液樣本:至少需要2毫升。 2、尿液樣本:推薦量不少於5毫升。 3、組織樣本:根據組織類型和實驗需求而定,一般不少於50毫克。 4、細胞樣本:對於哺乳動物細胞系,通常需要1×10^7個細胞/樣本。 5、植物和微生物樣本:樣本量需根據具體實驗需求而定,但通常也需達到一定的數量以確保檢測的準確性和重複性。樣本量過少可能會在一定程度上影響檢測的準確性和重複性。因此,在收集樣本時應盡量多收集並分裝凍存,避免反复凍融。同時,在寄送樣本時也應使用足量乾冰以確保樣本在運輸過程中的穩定性。

代謝組學測序的成功與否在很大程度上取決於樣本的選擇和样本量的設計。合理的樣本選擇能夠確保數據的代表性,而合適的樣本量能夠提高實驗的統計功效,幫助研究者更好地發現代謝差異。

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