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NGS(Next Generation Sequencing,次世代定序)實驗室工作站是專為高通量定序技術設計的自動化工作平台,它整合了多種功能模組,包括樣本前處理、文庫建置、PCR擴增、定序前準備以及(在某些情況下)數據分析等步驟,旨在提高實驗效率、減少人為誤差,並確保實驗結果的準確性和重複性。
一、NGS實驗室工作站主要特點
1、高度自動化:
1>自動化處理樣本:從樣本的分裝、核酸萃取、文庫建置到定序前準備,均可實現無人值守或極少人工幹預的自動化操作。
2>自動化數據分析:部分工作站還整合了數據分析軟體,能夠自動處理定序數據,提高分析效率和準確性。
2、高精度和一致性:
1>透過精密的儀器和優化的實驗流程,確保每次實驗結果的穩定性和一致性。
2>減少人為操作帶來的誤差和污染風險。
3、高效性:
1>大幅提高實驗通量,支持同時處理多個樣本。
2>縮短實驗週期,提高實驗室整體工作效率。
4.靈活性:
1>工作站通常支援多種NGS試劑和方案,滿足不同實驗需求。
2>可依實驗室的具體情況進行客製化和升級。
二、NGS實驗室工作站的主要功能:
1、樣本前處理:
1>自動完成樣本的分裝、標記和存儲,減少人為操作誤差。
2>自動化進行DNA/RNA的萃取,採用磁珠法、矽膠膜法等高效萃取技術,確保核酸的純度與完整性。
3>樣本品質控制,以螢光定量、電泳等方法評估核酸質量,確保後續實驗的順利進行。
2、文庫建置:
1>自動化完成DNA/RNA片段化、末端修復、加A尾、連接接頭等步驟,建構定序文庫。
2>支援多種文庫建置方案,如PCR-free文庫、單鏈文庫等,滿足不同定序平台的需求。
3>文庫品控,透過qPCR、文庫大小檢測等方法評估文庫質量,確保文庫的有效性和均一性。
3、靶向序列捕獲(可選):
1>對於需要標靶定序的實驗,工作站可自動化完成標靶序列的捕捉與富集。
2>支援多種捕獲技術,如雜交捕獲、PCR擴增捕獲等,提高定序的針對性和深度。
4、PCR擴增:
1>自動進行文庫擴增,確保文庫中的DNA/RNA分子達到定序所需的濃度。
2>可控制的PCR循環數和溫度條件,減少擴增偏差和非特異性擴增。
5.測序前準備:
1>將擴增後的文庫純化,以去除未反應的引子、dNTPs等雜質。
2>定量檢測文庫濃度,確保每個定序通道上樣量的一致性。
3>將文庫載入到定序晶片或流動池中,準備進行定序。
6、數據分析支援(部分工作站):
1>部分NGS實驗室工作站整合了數據分析軟體或接口,能夠自動處理定序數據,進行初步的數據品管、比對、變異檢測等分析。
2>提供直覺的資料視覺化工具,幫助研究者快速理解實驗結果。
7、自動化管理:
1>配備先進的自動化控制系統和軟體,能夠自動執行預設的實驗流程,減少人工幹預。
2>支援多任務並行處理,提高實驗室的整體工作效率。
3>提供實驗記錄和數據分析報告,方便實驗室管理和研究計畫的追蹤。
三、建設要求
NGS實驗室工作站的建造需要符合一定的標準和要求,包括:
1.實驗室環境:必須擁有符合相關規定的標準NGS實驗室,確保實驗室的無菌無塵環境。
2.設備配置:配備高通量定序儀及配套伺服器、自動分析軟體、實驗室樣本資訊管理系統等必要設備。
3.人員培訓:檢測人員必須通過專門的技能培訓,並獲得相應的上崗證書。
4.管理制度:建立嚴格的實驗室管理制度、標準化作業程序(SOP)和品質管理文件,確保實驗室日常運作符合國家衛生部的要求。
四、總結
NGS實驗室工作站是高通量定序技術的重要支援平台,透過高度自動化、高精度和高效性的特點,為臨床疾病篩檢、診斷及科研提供了強而有力的支援。隨著技術的不斷進步和應用的不斷擴展,NGS實驗室工作站將在更多領域發揮重要作用。
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