OT-2 移液工作站吸頭長度及移液管偏移校準

大家好，我是 Ethan，Opentrons的技術支援負責人，本系列影片是 0T-2從開箱到協議運行系列的第六期。在上期影片中，我們完成了甲板校準，接下來讓我們開始在OT-2 上進行吸頭長度校準，在吸頭長度和移液器偏移校準操作中，我需要使用到校準鋁塊，我用到的吸頭有:20ul和1000ul的型號，我需要用到計算機和OT-2，移液管已經連接上OT2了，這一步在上期視頻已經完成了，吸頭長度校準說明了吸頭如何適配特定物理移液器的噴嘴，只要校準完成，OT-2 就可以知道如何在協議運行時移液器的上下以及遠近移動，從而使吸頭保持在正確的高度，吸頭長度校準不用考慮各個吸頭之間的差異，OT-2假定每個吸頭與同一型號的其他吸頭具有-致的長度，我將用到設備應用程式和 Opentrons 應用程式來啟動校準。

首先選擇我要校準的設備，只要我沒有完成校準，這裡就會提示，提醒我完成移液器偏移校準或吸頭連接校準。現在我點擊校準，當您第一次開始校準吸頭長度和移液器偏移的時候設備會詢問您是否需要用到校準鋁塊，如果您沒有校準鋁塊，您可以使用垃圾槽替代，我現在有這個鋁塊，所以我會用鋁塊來校準，我會點擊記住我的選擇以備下次使用，這樣它下次就不會提示了。

我將繼續使用校準塊，OT-2現在將回到起始狀態並為校準做好準備，我需要一個吸頭架，最好是0pentrons 的，和一個校準鋁塊，我擺好了，讓我們開始校準。 Opentrons應用程式將引導我完成校準吸頭長度校準，我需要把校準鋁塊和吸頭架放在對應的板位上，移液器Z軸移動到校準塊以測量噴嘴，我需要向下移動移液器，以確保噴嘴與校準塊的距離小於1毫米，此時噴嘴距離校準塊不到1毫米，我會保存此校準結果，移液器將移至吸頭架中的第一個吸頭位置以拾取吸頭，我需要放下移液器，以確保移液器噴像APP士動畫展示的那樣對齊。

噴嘴已對齊，我要讓移液器拿起吸頭，我的移液器能夠拿起吸頭，單擊移動以測量吸頭長度按鈕，移液器將移回校準塊以測量吸頭長度，我需要將移液器移在一個小支架上，以確保它離校準塊的距離小於1毫米，噴嘴距離校準塊1毫米，現在我將保存吸頭長度設置，我將移除校準塊以繼續進行移液器偏移校準，移液器偏移權準補償兩個移液器之間的距離，基於OT-2 和移液管的製造差異，每個移液器都有自己的移液器偏移量，我需要校準以確保最高精度的OT-2 已經附有吸頭，所以它將用於校準過程，該應用程式將引導我完成每個移液器的校準。移液管校準的過程與甲板校準類似，首先移動到插槽5-以測量Z通道，然後我將移動它，使移液器與甲板的距離小於0.1 毫米，z軸位置距離甲板小於1毫米，我將保存此校準，移液器將移動到板位1中的十字。

與甲板校準類似，我需要對齊移液器，使吸頭未端位於插槽1中十字的中間，我的一開始有點偏，慢慢移動，這樣就對齊了，我將移液器與十字對齊，現在可以儲存校準，當「綠色鉤子」和移液器偏移完成訊息出現時，表示校準完成了。我會讓移液器將吸頭放回吸頭架，然後繼續下一個校準，OT-2 現在復位了，到這裡左支架上的P20 移液器的吸買長度校準和偏移校準已完成，我現在要用P1000 移液管執行相同的流程。首先，我要把 20 μl吸頭架從甲板上拿下來，並把它放在一邊，我現在將在右側啟動吸頭長度校準和移液偏移校準。我進入裝置頁面的時候可以看到，由於我之前沒有校準過右側的移液支架，有一條提示說我現在需要校準它，我現在點擊校準，　　　　應用程式會指導我如何進行吸頭長度和移液器偏移校準，和上次一樣，我需要與移液器相關聯的吸頭架，在這種情況下它是1000 μl吸頭架，我需要校準鋁塊，這些我都有，這次校準開始了，我需要將校準塊放在板位1中，在右側。然後我需要將吸頭架放在板位8中，和之前一樣，在板位8中取下頂部的吸頭架，校準鋁塊放在板位1中，我們現在可以確認放置並繼續校準， P1000 移液器將下降到校準鋁塊，就像之前的步驟一樣，我需要將它緩慢地移動下來，使噴嘴接近但不接觸到校準鋁塊，移液器噴嘴離校準鋁塊不到0.1毫米的距離了，我將保存這個設置，然後繼續拾起一個吸頭，我現在需要定位移液器，使其位於吸頭A1的中心，移液器的噴嘴現在位於吸頭A1 的中心，並且與吸頭的頂部齊平，我現在要讓移液器拿起那個吸頭，應用程式詢問我移液器是否能夠拾取吸頭，已經成功拾取了，點擊確定，然後開始測量吸頭長度。

我們將移動到板位1中的校準塊，慢慢移動，使吸頭接近但不要接觸到校準鋁塊，完美！現在它停留在距離校準鋁塊不到0.1毫米的距離，我現在將保存這個長度，現在吸頭長度已校準完成，應用程式上有一個「綠色鉤子」標記，我現在需要從甲板上取下校準鋁塊，並繼續進行移液器偏移校準，所以我會選擇繼續進行下一步操作，就像甲板校準和先前的移液器偏移校準一樣，我需要降低移液器，使其距離板位5中的甲板不到0.1毫米，移液管吸頭已經無限接近5號板的甲板了，距離不到 0.1毫米。我將保存此校準結果，移液器將移動到第一個板位邊緣，我現在需要點擊移動機器人，直到吸頭正位於第一個板位中的十字中心。現在吸頭精確地位於第一個板位的的十字上，保存校準結果，我知道移液器偏移校準已完成，因為螢幕上有一個「綠色鉤子」。我現在讓移液器將吸頭放回吸頭架並退出校準。 OT-2重位，吸頭長度和移液器偏移校準已完成。　　　　在協議運行之前，我們本期影片到此結束，感謝收看本系列的第六期，現在我已經校準了移液器長度和移液器偏移量，接下來我們將繼續指導如何運行協議。感謝收看，我們下期再見！

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